调理肉制品检测

本方案适用于猪和鸡的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中地克珠利和托曲珠利砜残留量的测定，定量限为50μg/kg。

(1)标准储备液0.25mg/mL: 称取地克珠利、托曲珠利砜对照品各25mg，精密称定，用N,N-二甲基甲酰胺50mL溶解，加乙腈稀释并定容至100mL容量瓶中，配制成浓度为0.25mg/mL的标准储备液。

(2) 标准工作液100μg/mL: 准确量取标准储备液4mL，用乙腈稀释并定容至10mL容量瓶中，配制成浓度为100μg/mL的标准工作液。

(3) 标准工作液10μg/mL: 准确量取标准储备液0.4mL，用乙腈稀释并定容至10mL容量瓶中，配制成浓度为10μg/mL的标准工作液。

称取试料(5±0.05)g，置于50mL离心管中，加入1颗陶瓷均质子(Cat.#: 1103)，加入无水硫酸钠5g，乙腈10mL，涡旋混匀(脂肪、家禽皮+脂先置50℃水浴加热5min融化后涡旋混匀)，中速振荡10min，6000rpm离心5min，取上清液移至另一新的离心管中，加正己烷30mL，振摇1min，6000rpm离心5min，分离乙腈层。残余物再按上述步骤重复提取一次，乙腈层经同一份正己烷分配，振摇1min，6000rpm离心5min，分层，合并乙腈层于60℃氮吹至近干，残渣加入95%乙腈溶液5mL，涡旋混匀，为待净化液。

注：样品加入5g无水硫酸钠，先搅拌均匀后，再加入10mL乙腈。

ProElut^® AL-B 2g/12mL(Cat.#: 65207)

(1)活化：加入10mL 95%乙腈水溶液，弃去流出液；

(2)上样：将待净化液加入柱中，弃去流出液；

(3)淋洗：加入3mL 95%乙腈水溶液，弃去流出液；

(4)洗脱：加入7mL 80%乙腈水溶液，收集洗脱液；

(5)重新溶解：将洗脱液在60℃下氮气吹至干，用乙腈-0.3%乙酸水溶液定容至1mL，涡旋混匀1min，超声2min，混匀后过0.45μm 尼龙膜(Cat.#: 37180)，上机分析。

色谱柱：Diamonsil^® Plus C18, 250x4.6mm, 5μm (Cat.#: 99403)

流速：1.0mL/min

进样量：50μL

柱温：30℃

检测器：PDA  270nm

流动相：A:乙腈    B:0.3%乙酸水溶液

梯度设置：

猪和鸡的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中地克珠利和托曲珠利砜残留量的检测添加回收结果。

添加浓度6000μg/kg(加标量:100μg/mL,0.3mL)

添加浓度500μg/kg(加标量:100μg/mL,0.025mL)

添加浓度50μg/kg(加标量:10μg/mL,0.025mL)

精密量取混合标准工作液适量，用乙腈-0.3%乙酸水溶液稀释并定容，制成浓度为0.1μg/mL、0.25μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、30.0μg/mL、50.0μg/mL的系列标准工作液，供液相色谱测定，以测得峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程和相关系数。